This European Standard specifies a method for the determination of the mass fraction of niacin in foodstuffs by high performance liquid chromatography (HPLC) by three different ways of hydrolysis, acid hydrolysis (A), enzymatic hydrolysis (B) or acid/alkaline hydrolysis (C). The method has been validated in interlaboratory tests on fortified and non-fortified samples such as breakfast cereal powder, chocolate cereals, cooked ham, green peas, lyophilized green peas with ham, lyophilized soup, nutritive orange juice, milk powder and wheat flour, at levels from 0,5 mg/100 g to 24 mg/100 g. For further information on the validation data, see Annex B. A and B give similar results for niacin. In options A and B niacin is calculated as the sum of nicotinamide and nicotinic acid, and expressed as nicotinic acid. Option C gives higher results than A and B for niacin with non-supplemented cereals, but similar results for other products. In option C, niacin is calculated and expressed as nicotinic acid after transformation of nicotinamide into nicotinic acid. Option A is faster and cheaper than B and C. Option B is used if an exact quantification of nicotinamide and nicotinic acid is needed. This cannot be done with option A, because there is a slight transformation of nicotinamide into nicotinic acid during the acid hydrolysis. Option C quantifies total niacin. The alkaline hydrolysis is able to liberate other forms giving higher results for niacin, which in some foods such as maize and cereals are not normally biologically available. Information on a comparison between the three different ways of hydrolysis is given in Annex C.
Diese Europäische Norm legt ein Verfahren für die Bestimmung des Massenanteils an Niacin in Lebensmitteln mit Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC) nach drei verschiedenen Hydrolysemöglichkeiten fest. Säurehydrolyse (A), enzymatische Hydrolyse (B) oder saure/alkalische Hydrolyse (C). A und B ergeben ähnliche Ergebnisse für Niacin. Bei den Optionen A und B wird Niacin als die Summe von Nicotinamid und Nicotinsäure berechnet und als Nicotinsäure angegeben. Option C ergibt bei Niacin in nicht-angereicherten Cerealien höhere Ergebnisse als A und B, aber bei anderen Proben ähnliche Ergebnisse. Bei der Option C wird Nicotinamid in Nicotinsäure umgewandelt und das Niacin als Nicotinsäure berechnet und ausgedrückt. Option A ist schneller und preiswerter als B und C. Option B wird verwendet, wenn eine genaue Quantifikation von Nicotinamid und Nicotinsäure erforderlich ist. Hierfür ist die Option A nicht geeignet, da während der Säurehydrolyse Nicotinamid in geringem Maße in Nicotinsäure umgewandelt wird. Option C kann für nicht-angereicherte Cerealien hilfreich sein. Denn in diesem besonderen Falle hat sich gezeigt, dass die alkalische Hydrolyse andere Derivate freisetzen kann, was zu höheren Befunden von Niacin führt. Ein Vergleich der drei verschiedenen Hydrolysewege ist im Anhang wiedergegeben.