This part of ISO 9308 specifies a method for the enumeration of E. coli and coliform bacteria in water. The method is based on the growth of target organisms in a liquid medium and calculation of the "Most Probable Number" (MPN) of organisms by reference to MPN tables. This method can be applied to all types of water, including those containing an appreciable amount of suspended matter and high background counts of heterotrophic bacteria. However, it must not be used for the enumeration of coliform bacteria in marine water. When using for the enumeration of E. coli in marine waters, a 1 to 10 dilution in sterile water is typically required, although the method has been shown to work well with some marine waters that have a lower than normal concentration of salts. In the absence of data to support the use of the method without dilution, a 1 to 10 dilution is used.
This method relies upon the detection of E. coli based upon expression of the enzyme beta-D-glucuronidase and consequently does not detect many of the enterohaemorhagic strains of E. coli, which do not typically express this enzyme. Additionally, there are a small number of other E. coli strains that do not express beta-D-glucuronidase.
The choice of tests used in the detection and confirmation of the coliform group of bacteria, including E. coli, can be regarded as part of a continuous sequence. The extent of confirmation with a particular sample depends partly on the nature of the water and partly on the reasons for the examination. The test described in this part of ISO 9308 provides a confirmed result with no requirement for further confirmation of positive wells.
Dieser Teil von ISO 9308 legt ein Verfahren für die Zählung von E. coli und coliformen Bakterien in Wasser fest. Das Verfahren beruht auf der Vermehrung von Zielorganismen in einem flüssigen Medium und der Berechnung der "wahrscheinlichsten Keimzahl" (en: Most Probable Number, MPN) von Organismen unter Bezugnahme auf MPN-Tabellen. Dieses Verfahren kann auf alle Arten von Wasser angewendet werden, einschließlich derer, die eine beträchtliche Menge an Schwebstoffen und eine hohe Keimzahl heterotropher Begleitbakterien enthalten. Es darf jedoch nicht zur Zählung coliformer Bakterien in Meerwasser angewendet werden. Wird das Verfahren zur Zählung von E. coli in Meerwasser eingesetzt, ist üblicherweise eine Verdünnung in sterilem Wasser von 1:10 erforderlich, obgleich das Verfahren nachweislich mit einigen Meerwässern gut funktioniert, die eine niedrigere als die übliche Salzkonzentration aufweisen. Wenn keine Daten zur Unterstützung der Anwendung des Verfahrens ohne Verdünnung vorliegen, wird eine 1:10-Verdünnung verwendet.
Dieses Verfahren stützt sich auf den Nachweis von E. coli auf der Grundlage der Expression des Enzyms beta-D-Glucuronidase und folglich werden viele der enterohämorrhagischen Stämme von E. coli nicht nachgewiesen, die dieses Enzym üblicherweise nicht exprimieren. Außerdem gib es eine geringe Anzahl anderer E. coli-Stämme, die beta-D-Glucuronidase nicht exprimieren.
Die Auswahl der zum Nachweis und zur Bestätigung der coliformen Gruppe von Bakterien, einschließlich E. coli, angewendeten Untersuchungen kann als Teil einer kontinuierlichen Abfolge angesehen werden. Der Umfang der Bestätigung hängt bei einer bestimmten Probe teils von der Beschaffenheit des Wassers und teils von den Gründen für die Untersuchung ab. Die in diesem Teil von ISO 9308 beschriebene Untersuchung liefert ein bestätigtes Ergebnis ohne dass eine weitere Bestätigung positiver Vertiefungen erforderlich ist.