This Technical Specification describes the identification of Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) by
means of the detection of the following genes:
a) the major virulence genes of STEC, stx and eae (References [2][3]);
b) the genes associated with the serogroups O157, O111, O26, O103, and O145 (References [3][4]).
In any case, when one or both of the stx genes is/are detected, the isolation of the strain is attempted.
The isolation of STEC from samples positive for the presence of the genes specifying the serogroups in the scope
of this method can be facilitated by using serogroup-specific enrichment techniques (e.g. immunomagnetic
separation, IMS).
The protocol uses real-time PCR as the reference technology for detection of the virulence and serogroupassociated
genes.
This Technical Specification is applicable to:
1) products intended for human consumption and the feeding of animals;
2) environmental samples in the area of food production and food handling;
3) environmental samples in the area of primary production.
Diese Technische Spezifikation beschreibt die Identifizierung von Shiga-Toxin bildenden Escherichia coli (STEC) mit Hilfe des Nachweises folgender Gene:
a) der wichtigsten Virulenzgene von STEC, stx und eae (Literaturhinweise [2], [3]);
b) der mit den Serogruppen O157, O111, O26, O103 und O145 assoziierten Gene (Literaturhinweise [3], [4]).
In jedem Fall, wenn eines oder beide der stx-Gene nachgewiesen wird/werden, wird versucht, den Stamm zu isolieren.
Die Isolierung von STEC aus Proben, die positiv hinsichtlich der Anwesenheit von Genen solcher Serogruppen sind, die im Anwendungsbereich dieses Verfahrens liegen, kann durch die Anwendung serogruppenspezifischer Anreicherungsverfahren (z. B. immunomagnetische Separation, IMS) erleichtert werden.
In dem beschriebenen Verfahren wird die Real-time-PCR als das Referenzverfahren zum Nachweis der Virulenzgene und der mit bestimmten Serogruppen-assoziierten Gene angewendet.
Die vorliegende Technische Spezifikation ist anwendbar auf:
1) Erzeugnisse, die für den menschlichen Verzehr und als Futtermittel vorgesehen sind;
2) Umgebungsproben im Bereich der Herstellung und Handhabung von Lebensmitteln;
3) Umgebungsproben im Bereich der Primärproduktion.